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【傅里叶红外光谱仪测蛋白质】傅里叶红外光谱仪测蛋白质:基本原理和应用

YP官网示优官方账号 2023-04-26 资讯 676 views 0


傅里叶红外光谱仪如何测量样品

傅里叶红外光谱仪(Fourier Transform Infrared Spectroscopy,简称FTIR)是一种常用的分析技术,它可以快速且准确地确定分子中化学键及其结构信息。在生物医学领域中,FTIR广泛应用于检测蛋白质、核酸等大分子生物分子。

1. 傅里叶变换红外(FT-IR)光谱仪的基本原理

在介绍如何使用FTIR测量样品之前,首先需要了解 FT-IR 光谱仪 的基本构成和工作原理。通俗地讲,在这个装置中,通过将可见、近紫外线辐射导入到样品所处状况下的固体表面上,使得该区域内会产生振动模式变化;接着就能够通过透过该物料后并经同轴公差隙间反打至四元素探器或者金属板带来结论性数据;最终再进行不同处理与运算即可得到所需光谱图。

2. 如何准备样品

在FTIR中,样品的制备是非常关键的一个环节。首先要注意将粉末状或液体状态下的样品完整盖于透气膜片上,并且确保在干燥状态。其次,需要在光波区间内挑选较为宽广、范围覆盖率高且具有强吸附作用等特点以便对生物大分子进行测定 。对于纯植物和动物性质等单一物种绝大多数情况下能够采取直接测量处理,而若遇到混合杂交体系,则需要通过差谱法才能过滤出真正关心的部分信息。

3. FTIR测量参数设置

针对不同类型生命科学实验对象需笑適配相应设定参数 . 重要指标包括:探头长度、取值时间周期、空气管道厚度及其他设备相关数据;其中最为重要者则是获取信噪比后再确定所开启谐振器转速(RPM)与反射率调整位置是否正确调节;同时还要根据预期实验目标来确定使用哪个Apodization函数;除此之外还必须选择以特定的扫描方式进行测量,例如单次光滑、多次重复或基线调整等。

4. FTIR带来的生物分析应用

FTIR具备非常好的特征识别和组成鉴定能力。在蛋白质方面,通过对其二级结构进行振动谱分析,可以快速准确地确定蛋白质中α-螺旋、β-折叠和无规卷曲区域等位置信息;此外还可一维及其他纵向延伸相关数据让我们进一步提取出离子荷载及氢键获取更丰富的化学信息。这有助于研究者们针对肿瘤发展过程或感染机理做出更科学合理决策而不必担心遗漏控制因素。

总之, 傅立叶红外技术是目前最为先进、精度最高,并且使用率广泛的检测仪器之一,在医学领域尤为突显其作用。

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