氯化胆碱是一种重要的生物活性物质，广泛应用于医药、农业和食品等领域。因此，对其进行精确测定非常必要。本文将介绍采用傅里叶红外光谱法对氯化胆碱进行分析，并通过标准曲线法确定其含量。

仪器与试剂

本实验所使用的仪器有：Fourier transform infrared spectrometer (Nicolet iS10)；分光计（TU-1901，Puxi）；电子天平（FA2004-G10003）。试剂包括： 氯化钠、KBr，乙醇和D_2O。

实验步骤

1. 样品制备：

• 取适量的氯化胆碱溶于去离子水中，摇匀得到一个较为均匀的溶液。

2. KBr压片:

• 先将一定量的干燥KBr加入小瓷盘内，在110℃干燥箱中放入1小时。
• 稳重称取干燥后的KBr（约0.3~2.0g)置于细碾器内（我省略了振荡粉碎这个步骤），用玻璃棒均匀搅拌，再放入一定量的样品。
• 在清洁干净的壳体和压盖上夹好样品光盘，并将其放进手动压片机中。
• 选择合适的加压力度，在半小时内完成所有试样制备，制成薄膜。

3. D_2O溶液：

向标准比色皿中加入大约4mL 的D_2O, 然后接着滴加少量氯化胆碱溶液并反复搅拌至均匀混合；

D_2O是对质子共振谱NMR或者质子自旋演化核磁共振实验不会影响所需信号强度和解析度浓度最佳溶剂。

4. FTIR分析：

将KBr压片好的与未经处理、被D_2O溶解的氯化胆碱样品分别放入FT-IR仪器中，利用FTIR技术获取其红外光谱。

5. 建立标准曲线：

• 制备不同浓度的氯化胆碱标准溶液（0.1mg/mL、0.5mg/mL、1mg/mL、2mg/mL和4mg/mL），并进行相应的傅里叶变换红外光谱测定；
• 根据这些样品得到一组从4000/cm至400/cm范围内对应ν (Wavenumber), 和各自示波强度值I(Transmission)有关联关系函数Y=Log10(1/I)，X=ν 的数据。将这些数据代表点都作成散点图，并使用曲线拟合算法确定一个最佳逼近直线方程（y=-C*x+k）;
• 以淬火玻片上加入已知量的氯化胆碱为基础，先后绘制吸收峰与含钠物质呈现出来通常具有两大特征带，然后通过计算它们之间面积比是聚酰亚胺可控薄膜中存在哪种反应可能性指数:
  I = A(Area of Sample / Area of Standard)或者I = A(Area of Glycyrrhizin/ Area of L-Glycine), 进而建立氯化胆碱在该测试条件下的标准曲线;

6. 测定含量：

根据所建立的标准曲线，对待测样品进行傅里叶变换红外光谱分析，并根据吸收峰面积与标准曲线确定其含量。

以上为本文介绍的氯化胆碱傅里叶红外光谱分析及含量测定方法。该方法具有简单、快速、精确等优点，可以为相关领域中氯化胆碱研究提供有效方法和技术支持。

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